Estandarización de las etapas de establecimiento y multiplicación in vitro de plátano musa balbisiana variedad curare enano para la construcción de un protocolo de micropropagación

Abstract

El presente trabajo se realizó con el objetivo de estandarizar las etapas de desinfección,

establecimiento y multiplicación in vitro para la elaboración de un protocolo de

micropropagación de plantas de plátano variedad Curare enano en el laboratorio de

Biotecnología Vegetal de la Universidad del Magdalena. Para ello se evaluaron diferentes

métodos de desinfección empleando la combinación de dos concentraciones de hipoclorito de

sodio - NaClO (0,5% - 2%) y dos tiempos de inmersión (4 min - 2 min) para los explantes. A las

cuatro semanas se evaluaron explantes no contaminados, no quemados, libres de fenolización

y supervivencia. Para el establecimiento y consiguiente adaptación de los ápices se evaluó la

adición de tres concentraciones de Ácido Giberélico - GA3 (1, 1.5, 2.0 mg.l-1

) al medio de

cultivo, manteniendo las yemas en total oscuridad y transfiriéndolas de medio cada tres

semanas durante 18 semanas. Para inducir la proliferación de brotes y posterior multiplicación

se evaluó el efecto de tres concentraciones de BAP (1, 2,5 y 5 mg.L-1

) en combinación con dos

concentraciones de AIA (0,5 y 1 mg. L-1

) y un tratamiento control sin reguladores. En todas las

etapas se empleó el medio de cultivo constituido por las sales de Murashige y Skoog (MS),

suplementado con sacarosa (30 gr.L-1

), myo-inositol (100 mg.L-1

), tiamina (1mg.L-1

), agar (6

gr.L-1

), pH de 5,8 y 20 repeticiones por tratamiento. Para el análisis de los datos se emplearon

los programas: Pasw Statistics 18 para el análisis descriptivo de los datos, y el programa

Statistix 9 para las evaluaciones correspondientes a las pruebas de grupos homogéneos. En la

fase de desinfección se realizó un análisis descriptivo de los datos, enfocándose en las

medidas de tendencia central. Para la etapa de establecimiento y multiplicación, se llevaron a

cabo pruebas no paramétricas dada la naturaleza de los datos. En la desinfección de las yemas

de plátano la mejor respuesta se obtuvo en el tratamiento constituido por la inmersión de los

explantes en NaClO al 2% durante 2 minutos posterior al primer corte, seguido de una

segunda inmersión en NaClO al 1% durante 1 min después del último corte, y luego un triple

lavado con agua destilada estéril, con una eficiencia del 100% de explantes no contaminados y

sanos. En el establecimiento, la mejor respuesta de elongación de las yemas se obtuvo en el

tratamiento suplementado con una dosis de 1,5 mg.l-1 GA3, con una altura promedio de 2 cm

por explante. En la etapa de multiplicación, el medio de cultivo suplementado con 5,0 mg.l-1

de BAP y 1,0 mg.l-1

de AIA, indujo el mayor número de brotes totales en el primer subcultivo

(49), con una tasa de multiplicación de 2,39 a las nueve semanas.